Венерология

Посев на микоплазму

Посев на микоплазму является классическим методом диагностики урогенитального микоплазмоза.

Он позволяет не только установить диагноз, но и повысить эффективность этиотропного лечения.

посев на микоплазму и уреаплазму

 

Как выполняется посев на микоплазму и уреаплазму?

Материал из мочеполового тракта помещают в питательную среду и культивируют, создавая благоприятные условия для роста бактерий.

В последующем их идентифицируют, определяют количество, оценивают восприимчивость к антибиотикам.

Для культивирования урогенитальных микоплазм используются любые среды: жидкие, полужидкие (содержащие 0,3% агара) или плотные (1,3% агар).

В лабораторной практике чаще используют либо жидкие среды, либо плотные.

Питательную основу составляют пептоны и перевары.

Это может быть ферментативный перевар из бычьих сердец.

Для микоплазм должны обязательно использоваться факторы их роста.

Это добавки холестерина и его производных, а также жирные кислоты.

Микоплазмы нуждаются в фосфолипидах, гликолипидах и фосфогликолипидах.

Важное значение имеет не только выявления бактерий, но также их идентификация.

Уреаплазмы и микоплазмы очень похожи.

Чтобы их отличить, бак посев проводят на среды с аргинином и мочевиной.

Уреаплазмы отличаются тем, что могут ферментировать мочевину, а микоплазмы таких свойств не имеет.

В свою очередь микоплазма в жидкой питательной среде ферментирует аргинин.

В ходе этой реакции образуется аммиак.

Он смещает рН среды в щелочную сторону.

Эти изменения легко определяются рН-индикатором.

В плотные питательные среды включают сульфат марганца.

Это вещество тоже способствует дифференциации микоплазм.

Если вырастает уреаплазма, то образуется оксид марганца.

Он окрашивает колонии в коричневый цвет.

анализ посев на микоплазму

Если на этой же среде растет микоплазма хоминис, колонии остаются бесцветными.

При помощи раститровки биоматериала лаборант может получить количественные результаты теста.

 

Преимущества бак посева на микоплазму и уреаплазму

Культуральное исследование обладает множеством преимуществ:

  • 100% специфичность – метод не дает ложноположительных результатов
  • возможность выделения чистой культуры бактерий для дальнейшего исследования
  • оценка чувствительности к антибиотикам и повышение эффективности лечения

Анализ посев на микоплазму стал значительно менее трудоемким после появления коммерческих питательных сред и тест систем.

Раньше использовались только зарубежные:

  • «MYCOFAST» компании «EliTech»
  • «MYCOPLASMA DUO» компании «Bio-Rad»
  • «MYCOPLASMA-IST» компании «BioMerieux»

Сегодня появились и отечественные системы:

  • «Микоплазма-50», «Микоплазма-АЧ», «Уреаплазма-50», «Уреаплазма-АЧ» и «Уреа/МикоСкрин-АЧ» производства ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера
  • набор «Уро-тест» производства ООО НПО «Иммунотэкс»

Они позволили снизить цену посева на микоплазму.

Системы позволяют не только проводить количественную оценку микоплазм, но и определять восприимчивость к антибиотикам.

 

 

Когда нужен посев на микоплазму хоминис?

Культуральная диагностика микоплазмоза не является рутинным тестом, который назначают всем подряд пациентам, обратившимся за медицинской помощью с симптомами воспаления урогенитального тракта.

Она проводится лишь по определенным показаниям.

В большинстве случаев для выявления микоплазм используют ПЦР.

Молекулярная диагностика позволяет всего за 1 день получить достоверные результаты обследования сразу на все часто встречающиеся ЗППП.

мазки ПЦР на микоплазму

Посев используется лишь в ограниченных случаях, так как имеет ряд недостатков:

  • длительность – культивирование микоплазмы хоминис на твердых питательных средах достигает 4 дней
  • низкая степень стандартизации и трудоёмкость
  • ниже чувствительность, чем у ПЦР
  • цена посева на микоплазму хоминис выше, чем у ПЦР

Посев нужен в основном для подбора терапии.

Он отличается тем, что позволяет оценить чувствительность к антибиотикам.

Это требуется:

  • при первом неудачном курсе лечения
  • в случае осложненного микоплазмоза
  • при длительном хроническом течении инфекции

 

Почему не делают посев на микоплазму гениталиум?

В любой лаборатории вам сделают посев на микоплазму хоминис.

А вот посев на микоплазму гениталиум в клинической практике не выполняется.

И это при том, что данный микроорганизм обладает более высокой патогенностью.

Он чаще вызывает воспалительные процессы репродуктивных органов и дает больше осложнений при беременности.

бактерия микоплазма гениталиум

Почему в таком случае посев на микоплазму гениталиум не выполняется?

Дело в том, что любые микоплазмы очень чувствительны к качеству питательных сред.

Для них нужны не только стандартные питательные субстраты, как для других бактерий, но также множество факторов роста.

Что же касается микоплазмы гениталиум, то среди всех микроорганизмов данной группы она самая требовательная.

Эта бактерия быстро погибает, долго и тяжело культивируется.

Поэтому посев применяется только с научными целями.

В клинической практике применение данного исследования не имеет смысла по нескольким причинам:

1. Чувствительность теста была бы очень низкой.

Чтобы получить культуру микоплазм, нужно поместить большое количество жизнеспособных бактерий в питательную среду.

Поэтому посев был бы малоинформативен в диагностике хронических форм.

К тому же, ложноотрицательные результаты он давал бы при малейших нарушениях правил подготовки к диагностике, забора или транспортировки материала.

2. Исследование имело бы высокую цену.

3. Оно занимало бы слишком много времени – микоплазма гениталиум культивируется до 1 месяца и более.

Естественно, в условиях, когда врач должен быстро установить диагноз и назначить лечение, ждать результатов так долго никто не будет.

Тем более что существует ПЦР, позволяющая получить данные о наличии в организме микоплазмы гениталиум уже через сутки после взятия мазка.

 

Оценка чувствительности микоплазмы к антибиотикам

Главная причина, по которой выполняется посев на микоплазму хоминис, это возможность оценки её восприимчивости к разным антибактериальным средствам.

антибиотикограмма в бак посеве на микоплазму

В большинстве случаев эта бактерия имеет восприимчивость к препаратам, угнетающим синтез белка.

Это тетрациклины и макролиды.

При этом воздействуют на неё не все антибиотики этих групп.

К некоторым у большинства микоплазм приобретена устойчивость.

На них почти никогда не действует эритромицин.

Но чувствительность к джозамицину и спирамицину остается высокой.

Тем не менее, у некоторых микоплазм обнаруживается резистентность ко всем макролидам.

Она развивается вследствие мутации в генах, соответствующей петле пептидилтрансферазы (область V) в 23S рРНК.

Активны в отношении микоплазмы фторхинолоны.

Но наблюдается тенденция к увеличению случаев резистентности.

Причиной является накопление мутаций в генах, кодирующих синтез ДНК-гиразы и топоизомеразы IV.

К тетрациклинам устойчивость тоже не является редкостью.

Она обнаруживается у штаммов с tetM детерминантой.

Исследования показывают, что невосприимчивость к тетрациклину наблюдается в 40% случаев.

Более чувствительными эти бактерии оказываются к доксициклину.

Таким образом, практически к любым антибиотикам микоплазма может быть резистентной.

Практически нет такого препарата, назначив который, можно было бы быть уверенным в успехе терапии.

Но её эффективность резко возрастает, если перед тем, как приступить к лечению, выполняется посев на микоплазму хоминис.

После того как вырастает культура бактерий, её проверяют на чувствительность к различным антибиотикам в разных разведениях.

бак посев на микоплазму и уреаплазму в лаборатории

Данная тактика особенно важна для пациентов, которые уже лечились от микоплазмоза и не получили положительного результата.

По данным исследований, посев многократно увеличивает эффективность проводимой терапии.

Если пациенту назначается лечение эмпирический (без учета данных антибиотикограммы), то риск неудачи составляет в среднем 37%.

Если же перед этим выполняется посев, вероятность повторного выделения микоплазмы после лечения не превышает 8%.

 

Подготовка к посеву на микоплазму

Перед тем как сдавать посев на микоплазму и уреаплазму, нужно подготовиться.

Основные рекомендации:

  • не принимать антибиотики
  • не пытаться лечиться антисептиками или другими местными препаратами
  • не вступать в половые контакты два дня
  • не мочиться три часа

Женщины не проходят гинекологическое исследование и не делают трансвагинальное УЗИ.

Анализы не сдаются в период менструаций.

 

 

Расшифровка посева на микоплазму

В бланке анализа указывается:

  • есть микоплазмы или нет
  • если есть, в каком количестве (указывается числовое выражение или просто сообщается, выше или ниже 10 в 4 степени КОЕ)
  • к каким антибиотикам микоплазма чувствительна, малочувствительна и резистентна

Количество бактерий большого диагностического значения не имеет.

Раньше считалось, что при выявлении микоплазмы в количестве 10 в 4 степени и меньше лечение не требуется.

Но сегодня мнение на этот счет изменилось.

Количественные показатели признаны малоинформативными.

Это связано с тем, что:

  • они демонстрируют количество бактерий в данный момент времени, но уже завтра или через неделю оно может кардинально измениться
  • количество определяется только в той зоне, откуда берется мазок, при этом основной очаг инфекции может располагаться в другом месте
  • даже при малом количестве микоплазм могут развиваться осложнения (хотя их риск в 3 раза ниже, чем при концентрации более 10 в 4 степени КОЕ)

Таким образом, любой положительный результат, даже если бактерий мало, может стать основанием для проведения лечения.

 

Противоречие с ПЦР на микоплазму

Бывает так, что ПЦР применяется одновременно с посевом.

При этом диагностические исследования дают разные результаты.

расшифровка результатов посева на микоплазму

Вариантов два:

  • ПЦР положительная, посев отрицательный
  • посев положительный, ПЦР отрицательный

Сразу следует сказать, что посев ложноположительным не бывает.

Если живые микоплазмы выросли на питательной среде, то вероятность, что они у вас есть, составляет 100%.

При этом результаты других исследований не имеют значения.

Если же ситуация обратная: ПЦР положительная, а культуральное исследование показывает отсутствие бактерий, скорее всего, это связано с малым их количеством в урогенитальном тракте.

Микоплазмы есть, но концентрация их низкая.

ПЦР, как более чувствительный тест, всё равно их обнаруживает.

А вот для эффективной культуральной диагностики нужно, чтобы бактерий было больше.

 

Контроль после лечения методом посева на микоплазму

Для контроля излеченности предпочтительно использовать методы, которые обладают самой высокой чувствительностью.

Потому что после курса терапии бактерий становится меньше, даже если они не исчезают полностью.

Соответственно, обнаружить их становится тяжелее.

Появляется риск, что посев даст ложноотрицательный результат.

Поэтому контроль лучше проводить с использованием ПЦР.

Только если она даст положительный результат (микоплазма снова обнаружена), проводится посев для определения восприимчивости бактерий к антибиотикам.

Очевидно, что раз первый курс терапии оказался неудачным, то микоплазма имеет чувствительность к некоторым препаратам.

Посев – это один из лучших способов преодоления резистентности к антиботикам за счет выбора препарата, к которому бактерия всё ещё восприимчива.

 

Какой врач берет посев на микоплазму?

Анализ берет врач-венеролог.

венеролог Ленкин С. Г. берет посев на микоплазму

Его также может взять уролог, андролог, гинеколог.

Если вы ищете, где сдать посев на микоплазму, обратитесь в нашу клинику.

Мы работаем с несколькими лабораториями и знаем, где можно получить достоверные результаты.

Опытный врач возьмет мазок безболезненно, без риска осложнений.

У нас все исследования проводятся по ценам лабораторий, без наценок со стороны клиники.

По результатам посева на микоплазму вы можете получить консультацию врача-венеролога.

В случае необходимости он подберет лечение на основе данных антибиотикограммы.

Такая терапия даже в случае хронической, неоднократно леченой формы микоплазмоза заканчивается успешно более чем в 90% случаев.

Для сдачи посева на микоплазму и уреаплазму обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.