Венерология

ПЦР 12 инфекций

Метод полимеразной цепной реакции является одним из эффективных способов лабораторной диагностики множества различных заболеваний.

Сокращенно метод называется ПЦР (по первым буквам), или PCR от английского «polymerase chain reaction».

анализ ПЦР на 12 инфекций

На чем основан метод?

Хранение и передача генетической информации в живых организмах осуществляется с помощью макромолекул ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты).

В некоторых случаях, например, у вируса иммунодефицита человека, такую функцию выполняет РНК (рибонуклеиновая кислота).

Каждый живой объект имеет свою уникальную последовательность структурных фрагментов макромолекул.

При этом набор «кирпичиков» ограничен всего четырьмя нуклеотидами.

В основе исследования лежит многократное копирование (создание так называемых «амплификаций») изучаемого фрагмента ДНК-цепи.

Даже небольшой кусочек ДНК может быть подвергнут разделению с последующим воспроизведением строго определенного участка с помощью ферментативного синтеза.

Количественное увеличение в исследуемом образце фрагмента ДНК с данной последовательностью позволяет провести визуальное сравнение с имеющимися образцами.

А затем и достоверно определить, какому организму он принадлежит.

Эксперименты по разработке ПЦР были проведены Кэри Мюллисом еще в 1983-1984 годах.

Спустя десятилетие американский ученый-биохимик получил Нобелевскую премию за свой труд.

По мере развития технологий расшифровки нуклеотидных последовательностей ДНК накапливались базы данных с соответствующими характеристиками различных биологических объектов.

И на сегодняшний день разработаны различные модификации метода, позволяющие обнаруживать следы микроорганизмов, мутации и многое другое.

 

Что такое анализ ПЦР 12?

В медицине ПЦР диагностика особенно эффективна в отношении выявления инфекционных заболеваний, в том числе и ИППП (инфекций с преимущественной передачей половым путем).

Многие лаборатории предлагают комплексное обследование на самые распространенные половые инфекции.

Например, подобный профиль есть у Инвитро (ПЦР 12 инфекций + мазок на флору).

При этом, в зависимости от исследователя, набор анализов может отличаться.

Если врач назначает обследование на половые инфекции, следует заранее поинтересоваться, в профиль «ПЦР 12» какие инфекции входят в данной лаборатории.

ПЦР 12 какие инфекции входят

В большинстве случаев перечень диагностируемых патогенных микроорганизмов включает выявление:

  • хламидий;
  • микоплазм;
  • уреаплазм;
  • кандид;
  • гонококков;
  • гарднерелл;
  • трихомонад;
  • вирусов герпеса (I и II типы);
  • цитомегаловируса;
  • вируса Эпштейна-Барр;
  • вирусов папилломы человека (ВПЧ) разных типов и групповой принадлежности;
  • ВИЧ;
  • вирусов гепатитов В и С.

Не все из перечисленного может включаться в профиль.

Где-то за отдельные исследования считают обнаружение вирусов разных типов (простого герпеса I-го и II-го типа, ВПЧ 16-го и 18-го типа) и не проводится анализ на ВИЧ, гепатит.

Где-то не включается исследование на ВЭБ и пр.

 

Кому и когда рекомендуется пройти обследование ПЦР 12

Распространенность половых инфекций очень высока.

Особенно их малосимптомных или бессимптомных форм (т. н. скрытых инфекций), оказывающих весьма негативное воздействие на здоровье человека.

Это объясняет высокую потребность в своевременной и адекватной диагностике.

взятие мазка ПЦР 12

Сдать анализ «ПЦР 12 инфекций» рекомендуется при наличии таких симптоматических проявлений, как:

  • любого вида выделения из половых органов;
  • зуд, боли, высыпания в окологенитальной зоне;
  • боли в надлобковой области, промежности;
  • проблемы с мочеиспусканием;
  • продолжительная субфебрильная температура, хроническая слабость, утомляемость;
  • пожелтение кожи, склер и др.

Профилактическое обследование на ИППП-12 ПЦР методом рекомендуется:

  • после незащищенного полового контакта со случайным партнером;
  • при наличии нескольких половых партнеров;
  • перед плановыми хирургическими вмешательствами;
  • в период планирования беременности;
  • при оформлении на работу;
  • при наличии хронических патологий;
  • неэффективности проводимой терапии.

Дать направление на обследование может как врач общего профиля, так и терапевт, гинеколог, уролог, венеролог и др.

После сомнительного контакта и при отсутствии проявлений оптимально проводить исследование спустя 2 недели.

Для такого исследования, как «ПЦР 12», цена зависит от лаборатории, включенных в профиль анализов.

Стоимость «ПЦР 12» (Москва) варьируется в пределах примерно 2500 – 4500 рублей.

Результат может быть готов уже в течение суток (обычно до 2-х рабочих дней).

Инвитро: ПЦР 12 Москва

Как показывают многочисленные исследования, ПЦР-диагностика:

  • является самым достоверным и высокоточным исследованием на возбудители генитального герпеса (герпес-вирусы 1-го и 2-го типов);
  • позволяет не только установить заражение папилломавирусами, но и идентифицировать их отдельные типы (например, вирусы 11 и 6 типов являются представителями группы низкого онкогенного риска и вызывают образование аногенитальных кондилом; вирусы 16 и 18 типов относятся к группе высокого онкогенного риска и могут провоцировать развитие рака шейки матки);
  • помогает определять эффективную терапевтическую тактику при бактериальном вагинозе, определяя микрофлорный состав влагалищной среды и выявляя основные маркеры патологического процесса (мобилункуса, гарднереллу и др.);
  • эффективна для выявления в любых биологических тканях цитомегаловируса;
  • практически незаменима при диагностике упорных кандидозов, вызванных Candida nonalbicans (такие грибки весьма устойчивы к стандартным противогрибковым препаратам, эффективным в отношении «обычных» Candida albicans).

На территории РФ и стран СНГ ПЦР применяется в диагностике гонококковой инфекции, а также в качестве анализа на хламидии у беременных при постановке на учет и перед родами.

 

Каковы преимущества и недостатки ПЦР-диагностики инфекций?

Преимущества исследования:

  • можно изучать любой биологический материал (клетки эпителия, кровь, мочу, слюну, сперму, выделения и пр.);
  • выявляются следы/части собственно инфекционного агента, а не продукты его распада или ответные реакции организма;
  • выявление ДНК-фрагмента, соответствующего только данному конкретному возбудителю;
  • удается обнаруживать всего несколько клеток (желательно порядка 10 – 100 в образце);
  • на все исследование уходит не более 5 часов;
  • можно диагностировать как острые, так и хронические, и бессимптомные формы заболеваний и др.

Относительные недостатки:

  • не самый дешевый метод;
  • не позволяет установить живой или неживой возбудитель обнаружен;
  • обнаруженный микроорганизм не является гарантированно причиной имеющихся проблем (благодаря высокой чувствительности обнаруживаются даже минимальные, клинически незначимые количества);
  • возможны ложноположительные/ложноотрицательные результаты;
  • предъявляет высокие требования к точности соблюдения техники проведения и к квалификации персонала.

 

Откуда и как берется материал для исследования ПЦР 12

Провести ПЦР-исследование можно практически для любого биоматериала.

эппендорф для ПЦР мазка

Для получения образца берутся соскобы из мочеиспускательного канала, влагалища, маточной шейки.

При этом правильная методика взятия биоматериала имеет очень важное значение.

Поскольку ПЦР очень точный метод, то попадание в исследуемую пробу посторонних примесей может исказить итоговые данные (ложноположительный результат).

Аналогично, если нарушена техника забора и материал взят не с подходящего участка, в пробу возбудитель не попадет и результат окажется ложноотрицательным.

Например, у женщин возбудители гонококковой инфекции обычно размещаются в канале шейки матки, а во влагалище могут отсутствовать.

У мужчин инфекционные агенты могут существовать в предстательной железе, придатках яичек при полном отсутствии в мочеиспускательном канале.

Стоит отметить, что применяемые ранее техники провокации (предполагаемого увеличения количества возбудителей при действии различных факторов) сейчас не используются ввиду неэффективности.

Для забора материала из органов урогенитального тракта применяются вагинальные тампоны и специальные зонды.

Подготовка к исследованию методом ПЦР на 12 инфекций зависит от исследуемого материала.

 

Как берется биоматериал на ПЦР 12 у женщин

Рекомендуется проводить забор перед менструацией или спустя пару суток по ее завершении.

Следует воздержаться от мочеиспускания и половых контактов в течение примерно 3-х – 4-х часов.

Непосредственно в день процедуры не нужно проводить гигиенический уход за половыми органами и спринцевания.

Примерно за неделю, после согласования с врачом, прекращают лечебные процедуры и прием препаратов.

Все манипуляции проводятся в процессе гинекологического осмотра.

забор мазка на ПЦР 12 у женщин

Забор осуществляется обычно из уретры, прямой кишки, канала маточной шейки и заднего влагалищного свода.

Важно, чтобы в образце отсутствовали примеси крови.

 

Как берется биоматериал на ПЦР 12 у мужчин

При подготовке к анализу рекомендуется воздержаться от приема лекарственных препаратов и проведения лечебных процедур за 5-7 дней до исследования, а от мочеиспускания – за 3-4 часа.

Материал берут из передней части уретры, как правило, с глубины 1 – 3 см от наружного отверстия.

забор ПЦР из уретры у мужчин

При необходимости предварительно проводят массаж простаты.

В целом процедура безболезненна, слегка дискомфортна.

Однако из-за механического травмирования слизистой могут кратковременно наблюдаться симптомы уретрита (небольшая болезненность мочеиспускания, раздражение и др.).

 

Общие правила забора анализа ПЦР 12

В общем случае при заборе биоматериала из уретры:

  • наружное отверстие предварительно обрабатывают тампоном, смоченным стерильным физраствором;
  • если есть выделения гнойного характера, соскоб берут или сразу или спустя примерно 20 минут после мочеиспускания;
  • если выделения отсутствуют, предварительно зондом проводят массаж уретры;
  • забор обычно осуществляется вращательными движениями после введения зонда на глубину 1 – 1,5 см у женщин, 3 – 4 см у мужчин;
  • у детей проводится только с наружного отверстия;

Из вульвы и влагалищного преддверия:

  • забор проводят стерильным ватным тампоном;
  • в случае воспаления бартолиновых желез проводится их пункция;

Из влагалища:

  • забор осуществляют из заднего свода или измененных областей;

Из канала шейки матки:

  • предварительно удаляют слизь ватным тампоном и обрабатывают стерильным физраствором шейку матки;
  • зонд вводя на глубину от 5 до 15 мм;
  • при эрозивных поражения материал берут с граничной области измененная/здоровая ткань;
  • зонд извлекается строго без касания влагалищных стенок;

Из матки:

  • забор проводят специальным шприцеподобным инструментом;

Из маточных придатков:

  • образцы (тканей, экссудата, гноя) берут в ходе операции либо чрезвлагалищной пункцией.

Моча на инфекции исследуется до начала приема антибиотиков после тщательной гигиенической обработки половых органов.

Собирается примерно 5 мл средней порции.

У мужчин при диагностике простатита отдельно исследуются три порции мочи (первая и средняя, а также последняя, собираемая после массажа простаты) и секрет предстательной железы.

ПЦР 12 по моче

Секрет простаты объемом около 1 мл собирают после массажа в сухую пробирку.

Если не удается получить простатический сок, анализируют первую порцию мочи (10мл), полученную после массажа простаты.

Для исследования на сифилис методом ПЦР материал берется из лимфоузлов и зон поражения.

Поскольку для большинства ИППП гематогенный путь распространения в организме не является основным, кровь для ПЦР-диагностики используется не для всех инфекций.

Возможно выявление методом ПЦР крови ВИЧ, вирусов гепатитов.

В случае длительного сохранения после полноценной терапии положительных серореакций (результатов исследований на антитела/антигены в крови) на сифилис может проводиться ПЦР выявление в крови участков ДНК трепонем.

В ситуации, когда исследуется кровь, особой подготовки не требуется.

Как правило, анализ делают натощак.

Если количество анализируемых объектов оказывается ниже предела чувствительности стандартных тест-систем (что случается при осуществлении ПЦР крови), предварительно образец может быть сконцентрирован.

Во всех случаях исследование проводится только после прекращения использования препаратов местного действия и после полного выведения действующих веществ из организма.

С целью контроля эффективности терапии анализ делают спустя 2 недели после окончания лечения (если нет симптомов).

Метод обладает высокой чувствительностью и может выявлять остатки ДНК даже нежизнеспособных патогенных микроорганизмов.

Поэтому контрольное исследование рекомендуют повторить через месяц от даты последнего приема лекарства.

 

О чем говорят результаты анализов ПЦР 12?

В большинстве лабораторий проводится качественный анализ.

Результат в таком случае выдается в форме «обнаружено»/«не обнаружено» и показывает имеется ли в образце фрагмент ДНК, специфичный для данного патогенного микроорганизма.

Если при проведении исследования методом ПЦР на 12 инфекций один или несколько показателей оказываются положительными?

Следует обратиться к врачу (гинекологу, венерологу, инфекционисту и пр.) для определения дальнейшей диагностико-лечебной тактики.

Количественный вариант ПЦР-диагностики (ПЦР «в реальном времени») используется реже и обычно не входит в профиль «ПЦР 12 инфекций».

Подобное исследование бывает необходимо для отслеживания динамики изменений в процессе проводимой терапии и для установления вирусной нагрузки.

Метод находит применение в отношении РНК вируса гепатита С, ДНК вируса гепатита В.

ПЦР крови на гепатит

При обнаружении соответствующих нуклеотидных последовательностей на бланке с результатами могут указываться цифровые значения в МЕ/мл (до 102, 102 - 108, от 108).

Такие данные важны при определении варианта дальнейшего ведения больного.

Так, противовирусное лечение гепатита В проводят, если число копий в 1 мл превышает 2000 МЕ/мл.

Параметр «контроль взятия материала», иначе КВМ, определяет достоверность полученных результатов.

Оценку такого параметра проводят до начала основного исследования.

При этом подсчитывают количество содержащихся в образце молекул и устанавливают возможно ли в принципе исследование.

Минимальное значение КВМ – 4 ед.

Если показатель ниже, то результаты признаются недостоверными и необходимо повторное взятие образцов.

Для сдачи анализа ПЦР на 12 инфекций обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.